1 脈動(dòng)真空滅菌器作業(yè)原理與特色
1.1  脈動(dòng)真空滅菌器作業(yè)原理
脈動(dòng)真空式滅菌體系介于滅菌重力轉(zhuǎn)換式器和高真空式滅菌器之間。
典型的蒸汽脈沖程序：在接連進(jìn)蒸汽條件下，抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定壓力，重復(fù)2～3 次；或抽真空到10.7～13.3 kPa(80～100 mmHg)的肯定壓力后，進(jìn)一次蒸汽(一個(gè)蒸汽脈沖)，重復(fù)2～3次，從而使腔體內(nèi)反復(fù)通入無(wú)熱原蒸汽，到達(dá)腔內(nèi)及滅菌物品冷空氣的有用置換，使腔內(nèi)無(wú)冷點(diǎn)。當(dāng)腔內(nèi)壓力穩(wěn)定時(shí)，滅菌蒸汽均勻地散布在腔內(nèi)滅菌物品的有用部位進(jìn)行徹底滅菌，確保了滅菌作用。接連進(jìn)蒸汽有利于避免和降低物品中空氣的殘留量。脈動(dòng)真空滅菌器腔室中的溫度-壓力曲線如圖2所示。當(dāng)然，假如因被滅菌物品性質(zhì)對(duì)比特別而有必要時(shí)，可選用3 次以上的蒸汽脈沖和抽真空過(guò)程。制藥企業(yè)常用的滅菌器一般屬脈動(dòng)式滅菌器，滅菌程序完成后，還需檢漏，因而需進(jìn)行相應(yīng)的功用設(shè)置。 

1.2  脈動(dòng)真空滅菌器特色
shou要長(zhǎng)處：(1)滅菌周期短；(2)不需求高的真空度；(3)空氣滯留疑問(wèn)?。?4)小裝量條件下仍有好的滅菌作用。
shou要缺點(diǎn)：(1)被滅菌品裝載過(guò)密時(shí)，滅菌作用差；(2)在真空度規(guī)模內(nèi)，實(shí)現(xiàn)蒸汽脈沖需求較雜亂的輔助設(shè)備(如真空泵、冷凝器、噴射泵等)，從而給修理和養(yǎng)護(hù)增加了難度。
2 設(shè)備運(yùn)用中常見(jiàn)疑問(wèn)及解決辦法
2.1 PLC毛病和觸摸屏的黑、白屏景象
目前，在配有觸摸屏式的脈動(dòng)真空滅菌器傍邊≥3.5 m3的設(shè)備中易發(fā)作PLC毛病和觸摸屏的黑、白屏景象。
發(fā)作此景象的要素：(1)PLC、觸摸屏自身的要素，如元件老化、DC24 V電源毛病等；(2)在滅菌完成后開(kāi)門時(shí)，滅菌器內(nèi)的蒸汽剎那間串出，與房間內(nèi)空氣觸摸構(gòu)成水蒸汽，對(duì)滅菌器的電路有些尤其是觸摸屏、PLC影響較大，容易發(fā)作受潮短路。
解決辦法：如元器件自身要素，可替換元器件，或選用加大滅菌器柜門上方的排潮電機(jī)功率、異地操控等辦法。
2.2 真空泵繼續(xù)作業(yè)負(fù)壓不降低
發(fā)作此景象的要素：(1)真空泵自身的要素如真空泵動(dòng)能降低、真空泵回轉(zhuǎn)；(2)總水壓過(guò)低 (＜0.1 MPa/cm2)；(3)水流速太小或自來(lái)水管道管徑太細(xì)等。
解決辦法：(1)對(duì)于客觀要素給予替換部件，如真空泵、水壓表、自來(lái)水管；(2)滅菌器自來(lái)水管**佳獨(dú)自一管道,并在水壓力表旁裝置水流量表,以隨時(shí)觀察水壓及水流速,避免因水流太小負(fù)壓不降低,使真空泵產(chǎn)生干抽景象導(dǎo)致部件損壞。
2.3 滅菌器密封門打不開(kāi)
發(fā)作此景象的要素：(1)閨閣有正壓或負(fù)壓；(2)門密封膠條沒(méi)抽回；(3)程序在運(yùn)轉(zhuǎn)；(4)門電機(jī)發(fā)動(dòng)電容損壞；(5)門內(nèi)傳動(dòng)體系損壞等。
解決辦法：(1)待室內(nèi)壓力回0后，再開(kāi)門；(2)查看真空泵是不是抽暇，門密封管路是不是堵塞，泵是不是回轉(zhuǎn)，是不是有水；(3)退出滅菌程序；(4)替換門電機(jī)發(fā)動(dòng)電容，查看門電機(jī)；(5)查看門內(nèi)傳動(dòng)體系。
3 影響滅菌作用的要素
3.1 物理/化學(xué)條件
在細(xì)菌構(gòu)成芽孢過(guò)程中的多種環(huán)境要素會(huì)影響孢子的耐熱性。例如，溫度較高并有二價(jià)陽(yáng)離子(如Ca2+ 、Fe2+ 、Mg2+ 、Mn2+)存在時(shí)，芽孢的耐熱性增強(qiáng)。與此相反，當(dāng)pH 超出6.0～8.0 的規(guī)模時(shí)，或在高濃度的鹽水或磷酸鹽中構(gòu)成芽孢時(shí)，其耐熱性降低。
自然界中芽孢的耐熱性與環(huán)境條件有關(guān)，如溶液濃度、水分、pH、對(duì)芽孢有損害作用的物理要素以及對(duì)芽孢有抑制作用的化學(xué)品等，均會(huì)影響芽孢的耐熱性。
包藏在晶體或有機(jī)物內(nèi)的芽孢，其耐熱性一般顯著高于一般非包藏態(tài)的芽孢。因而，在某一溫度條件下，將泥土包藏性芽孢和從泥土分離并培育得到的芽孢一起滅菌時(shí)，要想取得一樣的滅菌作用，同一滅菌溫度下，前者所需的滅菌時(shí)刻比后者要高出10多倍。因?yàn)楸粶缇肥艿搅四嗤林醒挎叩奈廴?，如在運(yùn)送處理中被未經(jīng)過(guò)濾空氣微粒污染，或許因人員或別的物品觸摸遭受污染時(shí)，要將芽孢徹底殺滅會(huì)很困難。正因?yàn)槿绱?，GMP請(qǐng)求采納全部必要的辦法避免污染。
3.2 相對(duì)濕度
在熱力滅菌中，水對(duì)殺滅細(xì)菌芽孢起著shou要作用。與水有關(guān)的滅菌方法只要2種：濕熱和干熱。濕度到達(dá)飽滿[相對(duì)濕度(RH)為 100％(或 aw＝1.0)]時(shí)的滅菌方法稱為濕熱滅菌；相對(duì)濕度低于100％條件下的滅菌方法統(tǒng)稱干熱滅菌。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)標(biāo)明，溫度在90～125 ℃之間，相對(duì)濕度在20％～50％時(shí)，細(xì)菌芽孢較難殺滅；當(dāng)相對(duì)濕度高于50％或低于20％時(shí)，則較易殺滅。這對(duì)挑選滅菌條件具有指導(dǎo)意義。
3.3 曝?zé)釙r(shí)刻
滅菌過(guò)程中，原核細(xì)胞的逝世(被殺滅)遵從一級(jí)反響的規(guī)則。溫度與某一時(shí)刻芽孢存活對(duì)數(shù)間的關(guān)系，在很多情況下呈線性。這就是說(shuō)，在特定的滅菌溫度下，任一時(shí)刻孢子逝世僅與這個(gè)時(shí)刻孢子的濃度有關(guān)，而使孢子數(shù)降低一個(gè)對(duì)數(shù)單位所需時(shí)刻并不受孢子初始濃度的影響。
4         脈動(dòng)真空滅菌器的驗(yàn)證
脈動(dòng)真空滅菌器的驗(yàn)證內(nèi)容shou要有裝置承認(rèn)、運(yùn)轉(zhuǎn)承認(rèn)及功能承認(rèn)。
4.1  裝置承認(rèn)
(1)查看及掛號(hào)設(shè)備的廠商稱號(hào)，設(shè)備稱號(hào)、類型、生產(chǎn)廠商編號(hào)及生產(chǎn)日期，公司內(nèi)部設(shè)備掛號(hào)號(hào)；(2)裝置地址及裝置情況是不是契合G家有關(guān)壓力容器的請(qǐng)求；(3)設(shè)備規(guī)范規(guī)范是不是契合規(guī)劃請(qǐng)求；(4)計(jì)量、外表的精確性和精確性；(5)設(shè)備相應(yīng)的共用工程和建筑設(shè)備的配套，如電源、真空體系、壓縮空氣體系、冷卻水等銜接是不是契合供貨單位提出的請(qǐng)求；(6)各種附件和備品（如壓力表、安全閥、電磁閥等）的規(guī)范、類型是不是核對(duì)和掛號(hào)；(7)擬定清洗規(guī)程及記載格局；(8)制定校對(duì)、保護(hù)養(yǎng)護(hù)及運(yùn)轉(zhuǎn)的SOP草案及記載表格局草案。#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
4.2  運(yùn)轉(zhuǎn)承認(rèn)
(1)蒸汽壓力和溫度在設(shè)定的規(guī)模內(nèi)；(2)滅菌器門的聯(lián)鎖體系安全可靠；(3)滅菌器正常運(yùn)轉(zhuǎn)所需的各種操作規(guī)程是不是樹(shù)立；(4)溫度監(jiān)控設(shè)備的挑選和校驗(yàn)契合滅菌程序請(qǐng)求。
合格規(guī)范：滅菌器的各步程序運(yùn)轉(zhuǎn)正常，與操作闡明書(shū)相符，無(wú)顯著誤差；全部運(yùn)轉(zhuǎn)中，無(wú)反常噪聲呈現(xiàn)。
4.3  功能承認(rèn)
4.3.1  熱散布實(shí)驗(yàn)
熱散布實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證滅菌器不一樣方位的溫度均一性的一項(xiàng)shou要實(shí)驗(yàn)，以搞清滅菌過(guò)程中腔室內(nèi)各個(gè)不一樣方位的溫差情況，為下一步熱穿透實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。它包含空載熱散布實(shí)驗(yàn)、滿載(80%裝載量)熱散布實(shí)驗(yàn)。
4.3.1.1  熱散布實(shí)驗(yàn)過(guò)程
(1)選用10～20個(gè)熱電偶或熱電阻作溫度探頭,編號(hào)，將其固定在滅菌器腔室的不一樣方位并用特氟龍密封帶和硅膠密封在滅菌器內(nèi)溫度探頭的裝置方位，應(yīng)包含也許的高溫點(diǎn)(如蒸汽入口處)及低溫點(diǎn)(如冷凝水排放口)，別的有一只探頭置于滅菌器溫度操控探頭處，一只探頭置于滅菌器溫度記載操控探頭鄰近，其余則均勻散布于滅菌器腔室內(nèi)，以使溫度的監(jiān)測(cè)具有代表性。在滿載熱散布實(shí)驗(yàn)中，裝載應(yīng)盡也許運(yùn)用待滅菌商品或類似物并留意不要將溫度探頭接入待滅菌的容器中，而應(yīng)在其周圍；(2)按初步設(shè)定的滅菌程序、滅菌參數(shù)及裝載方法進(jìn)行滅菌；(3)每種裝載方法**少應(yīng)進(jìn)行3次重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)取得的數(shù)據(jù)進(jìn)行收拾剖析，并在此基礎(chǔ)上斷定裝載的冷點(diǎn)方位；(4)實(shí)驗(yàn)前后都要將溫度探頭放入冰點(diǎn)槽和油浴里校對(duì)；(5)一般可在幾回空載實(shí)驗(yàn)斷定出冷點(diǎn)方位后，進(jìn)行**大和**小的裝載實(shí)驗(yàn)；(6)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)剖析，**冷點(diǎn)和腔室均勻溫度間差值不得超越±2.5 ℃，否則闡明設(shè)備功能差或存在某種毛病，形成此不良情況的要素在于規(guī)劃、裝置、裝載方法或操控手段存在缺點(diǎn)，應(yīng)加以改進(jìn)。
4.3.1.2 熱散布實(shí)驗(yàn)可接受的規(guī)范
(1)空載熱散布滅菌室的溫度均勻性≤±1 ℃；(2)滿載熱散布滅菌室的溫度均勻性≤±1.5 ℃；(3)溫度操控的規(guī)模,依據(jù)設(shè)備的精度自訂。
4.3.2  熱穿透實(shí)驗(yàn)
熱穿透實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證滅菌器及滅菌程序?qū)ι唐愤m用性的一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，目的是斷定滅菌室裝載中的“**冷點(diǎn)”，并承認(rèn)該點(diǎn)在預(yù)訂的滅菌程序中取得滿足的無(wú)菌確保值。
4.3.2.1  熱穿透實(shí)驗(yàn)的過(guò)程及請(qǐng)求
熱穿透實(shí)驗(yàn)的過(guò)程及請(qǐng)求與滿載熱散布實(shí)驗(yàn)大體一樣，shou要不一樣在于溫度探頭放置方法上，熱穿透實(shí)驗(yàn)請(qǐng)求溫度探頭應(yīng)當(dāng)刺進(jìn)待滅菌商品中，插有溫度探頭的商品應(yīng)放在以下方位: (1)熱散布實(shí)驗(yàn)斷定的**冷點(diǎn)方位；(2)蒸汽入口處或熱散布實(shí)驗(yàn)斷定的別的高溫點(diǎn)方位；(3)滅菌器溫度操控探頭鄰近；(4)溫度記載探頭處(假如滅菌器的溫度自動(dòng)操控和溫度記載不是共用溫度探頭時(shí))；(5)另需有記載腔室溫度的探頭,此探頭不刺進(jìn)商品中,方位在溫度操控探頭鄰近。
熱穿透實(shí)驗(yàn)**少需重復(fù)進(jìn)行3次，實(shí)驗(yàn)前后都要將溫度探頭放入冰點(diǎn)槽和油浴里校對(duì)。4.3.2.2  熱穿透實(shí)驗(yàn)可接受規(guī)范
(1)對(duì)于滅菌程序物品,裝載中各點(diǎn)所得到的**小F0值應(yīng)大于8 min；(2)**小F0值與均勻F0值的差值應(yīng)不大于2.5%。
4.3.3  生物指示劑驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
對(duì)熱穿透實(shí)驗(yàn)成果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)剖析可得出滅菌程序的運(yùn)轉(zhuǎn)參數(shù)，進(jìn)而斷定所用滅菌器對(duì)某一物品的滅菌程序。然后還要進(jìn)行生物指示劑驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，行將一定量已知D 值的耐熱孢子接入被滅菌的物品中，在預(yù)訂的滅菌條件下滅菌，以驗(yàn)證設(shè)定的滅菌技術(shù)是不是真正能賦予物品所需的規(guī)范滅菌時(shí)刻F0值。
4.3.3.1  生物指示劑的耐熱性
蒸汽壓力滅菌程序驗(yàn)證，常用的生物指示劑有嗜熱脂肪芽孢桿菌Bacillus stereathernophilus, 其常規(guī)微生物耐熱參數(shù)D121 ℃值為1.5～3.0 min。因?yàn)橥簧镏甘緞┰诓灰粯咏橘|(zhì)或載體上的耐熱性不一樣，所以在實(shí)驗(yàn)前要測(cè)定生物指示劑在待滅菌物品中的耐熱性，并依據(jù)其耐熱性斷定驗(yàn)證時(shí)所要接種的孢子數(shù)量，或是不是需求選用一種規(guī)范溶液來(lái)代替某物品作為生物指示劑的介質(zhì)。
4.3.3.2 生物指示劑的裝載
為了精確反映滅菌程序?qū)ξ锲返臏缇饔?，生物指示劑一般被接種入被驗(yàn)證物品的包裝容器中，如生物指示劑與被驗(yàn)證物品不相容，可用pH值及粘度與物品類似的介質(zhì)，生物指示劑驗(yàn)證可與熱穿透實(shí)驗(yàn)一起進(jìn)行，裝有生物指示劑的容器要緊挨著裝有測(cè)溫探頭的容器，在滅菌設(shè)備的**冷點(diǎn)處有必要放置生物指示劑，冷點(diǎn)一般坐落蒸汽或冷凝水出入口鄰近，為便于精確剖析驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)成果，一切的生物指示劑與測(cè)溫探頭的放置應(yīng)有相對(duì)應(yīng)的編號(hào)。
4.3.3.3 生物指示劑驗(yàn)證合格規(guī)范
經(jīng)生物指示劑驗(yàn)證后可證實(shí)在設(shè)定的滅菌程序或F0條件下，物品的無(wú)菌確保水平低于10-6。